常見問題
答: 1)在低壓均勻電場下,獲得高轉染效率和高存活率;2)可進行不同細胞量轉染(3×10<sup>7</sup>-1×10<sup>10</sup>);3)通過GMP車間生產的電轉耗材,且通過環氧乙烷滅菌;4)操作簡單方便。
關鍵詞:
電轉染儀,優勢
答:電極類型進行設定:96孔板電極針常用電轉體系為1×10<sup>6</sup> cell/(3-5)μg plasmid/100μl buffer。電轉參數的設定主要與細胞的類型、選擇的電轉緩沖液以及選擇的質粒有關。對于常見細胞的電轉,參考細胞檔案庫。
關鍵詞:
電轉體系,電轉參數
答:我們的電極是有使用壽命限制的。由于我們的電極采用的是生物親和性不銹鋼材料,材料中去除了錳、鉻、鎳等非生物親和性的離子。所以電極針在經過一定次數的電擊后,會出現表面氧化等情況,影響電轉效果。所以一般情況下,每個電極在電轉100個孔后,便不再建議繼續使用。
關鍵詞:
電極,使用壽命
電轉過程中電極針上是否會有細胞粘附?若重復使用同一個電極進行電轉操作,是否會造成不同組間電轉結果的相互影響?
答:電極針上不會有細胞粘附。大量的實驗測試表明,將電極針的直徑調整為400μm時,能夠消除電擊過程中兩個相鄰電極間的液體張力,避免發生細胞粘附電極針的現象。若僅是電擊參數的不同,重復使用同一個電極不會造成不同組間電轉結果的相互影響,但若是電轉緩沖液、質粒及細胞的均不同,我們建議將電極經75%酒精清洗處理后再重復使用。
關鍵詞:
細胞粘附
答:我們電轉耗材是無菌的,全過程可在超凈臺內操作,保證了操作過程中的無菌。如果電極重復使用,可將電極用75%的酒精進行噴灑或浸泡處理。再次使用前先通過紫外照射30mins,便可以保證后續重復使用的安全無菌。
關鍵詞:
無菌